影印平板培养法
影印平板培养法
影印平板培养法是一种通过盖印章的方式,达到在一系列培养皿平板的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种和培养方法。年,莱德伯格夫妇的论文《平板影印培养法和细菌突变株的间接选择》,以确切的事实证明了微生物的抗药性是在未接触药物前自发地产生的,这一突变与相应药物环境毫不相干。
实验过程如下:把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有一层灭菌丝绒布的木质圆柱印章上,使其均匀地沾满来自母培养皿平板上的菌落。然后可把这一“印章”上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。经培养后,对各平板相同位置上的菌落进行对比，就可选出适当的突变型菌株。
当我们在讲授年全国I卷的选修题目时，由题意可知，含有质粒载体的大肠杆菌和含有重组质粒的大肠杆菌由于它们具有氨苄青霉素抗性基因，均能在含有青霉素的培养基上生存，要想得到含重组质粒的大肠杆菌，还必须再用到含有四环素的培养基。
一部分学生会提出自己的疑问?由于含有重组质粒的大肠杆菌已经不含完整的四环素抗性基因，再转入含有四环素的培养基不就把含有重组质粒的大肠杆菌杀死了吗？反而想要的???不到？确实有学生这么想的！
其实，大家回过头来，看看#影印平板培养法#，应该就能够理解了。将菌种(含质粒载体的大肠杆菌和重组质粒载体的大肠杆菌)接种在不含药物的普通平板表面,待其长出菌落后,用影印平板培养法接种到含四环素的平板上。由于含重组质粒的大肠杆菌在含有四环素的选择培养基上不能生存,故在该平板上相应位置没有菌落出现，通过比较普通平板和含有四环素的平板就可以在相同位置找到含重组质粒的大肠杆菌，找到指定菌落后就可以在普通培养基进行扩大培养。
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