基因表达的调控对于包括功能基因组学、组织工程、基因治疗和生物制药制造在内的各种基础和应用生物学研究领域至关重要。由于某些致死基因或必需基因不可能过度表达或敲除,因此,有必要对其表达进行微调以分析其功能。此外,基因表达的不可逆操纵通常会驱动高等生物的补偿性适应。因此,打开和关闭基因表达或以定量和定时方式调节基因表达水平的能力可以优先揭示某种遗传变化的直接后果,并提供额外的筛选方式以排除其他溢出和脱靶效应。这在处理由高度复杂的遗传网络维持和控制的哺乳动物细胞时尤其有益。
科学家们已经开发构建了多种基因诱导调控系统,允许通过外源效应分子对真核细胞中的基因表达进行定量和时间控制。其中,四环素诱导调控系统(tetracycline-regulatedsystem)是目前应用最广泛和最成熟的诱导表达系统。四环素诱导调控系统主要分为两种调节方式:Tet-on和Tet-off。Tet-On和Tet-Off系统提供了一种准确的并且可逆的方式来临时控制基因表达(on)或者沉默(off)。
其基本原理如下:
Tet-on系统:有四环素类化合物存在时,对应的基因表达会打开。如下图:
Tet-off系统:有四环素类化合物存在时,对应基因的表达会关闭。如下图:
基于上述原理,康源博创构建了多种Tet-on和Tet-off的细胞系,验证数据如下,欢迎联系我们。
Tet-on系统
qPCR检测靶基因表达
westernblot检测靶基因表达
HiBiT试剂盒检测靶基因表达
Tet-off系统
MCF7-TETOFF-GFPFACS检测结果
参考资料:
AtzeT.Das,LilianeTenenbaumandBenBerkhout.Tet-OnSystemsForDoxycycline-inducibleGeneExpression.CurrentGeneTherapy,,16,-
新靶点细胞模型AXL/NTRK/FLT3/ALK/EGFR/EGFRexon20/EGFRexon19/CLDN18.2/KIF5B-RET/OX40/NCI-HLR-TM-CS/Siglec9Siglec15/PIM1/Syk/FcγR/PD-L1阻断剂筛选平台/FGFR/KRAS/FGL1LAG3/Foxp3报告细胞株/CSF-1R/LAG3/BCMA/SLAMF7/AMHR2/LAIR-1/双特异抗体/IL-4R/CD24-SIGLEC10/CHO-ky抗体生产细胞株/SHP-2平台/SIGLEC15/CD80/BCR-ABL/P95HER2/LILRB2/CLDN18.2-2/CSF1R/CSF3R/HER2/c-MET/GPRC5D/KDR/FGFR2/EGFR/RET/NTRK/CCR8/BTK/BCR-ABL-2/FGFR/IGF1R/SOS2-KO/protac/BRAF/CLND6/PC9-CS/KDR/H-HGF/PVRIG/CTLA4-Δ23/FAP/CD93/LIGHT/PDGFRA/CCR4/TREM2/NRAS/BRAF
Jurkat报告细胞株模型PD1-PDL1/CD16-F/CD16-V/LAG3/CD3双特异抗体/ADCP/双特异抗体通用模型/CART/HPK1/CD/免疫检查点新靶点发现或验证平台/S蛋白筛选模型/TIGIT/CD24/18.2抗体和细胞模型/CD47-SIRPα报告细胞株/Tcellengager/HPK1-KO/CHO-K1(GS/FUT8-KO)/Wnt通路/SMAD-TGFβ报告细胞株/LAG3对照抗体/CD抗体/KDR/CD16/PD1抗体/LDH-HIBIT/STAT5
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