抗生素抗菌的机理分类
·CLASSIFICATION·
①抗生素作为DNA模板功能的抑制剂，抑制RNA转录的起始，以这种方式作用的抗生素主要有：放线菌素D、丝裂霉素C、利福霉素和利福平。
②与细胞核糖体或其反应底物相互作用，抑制蛋白质的合成，以这种方式作用的抗生素包括四环素类抗生素、大环内酯抗生素、氨基糖苷类抗生素。
③与细菌细胞膜相互作用，增强细菌细胞膜的通透性，打开膜上的离子通道，让细菌内部的重要营养物质（核酸、氨基酸、酶、磷酸等）漏出菌体或电解质平衡失调而死。
④作用于细菌的细胞壁，抑制其活性，从而抑制细胞壁的合成，造成细胞壁缺损，失去渗透屏障功能，导致菌体肿胀变形，最后破裂而死，以这种方式作用的抗生素主要为青霉素。
⑤作用于能量代谢系统或作为抗代谢物。
细菌结构与抗生素作用示意图
01
实验前准备
大肠杆菌菌种。
关键仪器：高压蒸汽灭菌锅、微量可调移液器、超净工作台、纯水机、电子天平、全温振荡器、恒温培养箱、玻璃涂布器、接种环。
试剂耗材：抗生素对细菌的选择作用试剂盒。
02
实验方法与步骤
03
实验成功的关键
1.抗生素溶液的无菌处理
绝大多数抗生素不耐高温，不可进行高压蒸汽灭菌，而且许多抗生素上的环状结构可以吸收紫外光，发生反应，导致变性，因而不可用紫外杀菌。抗生素溶液需要用细菌过滤器进行过滤除菌。
2.滤纸片的大小
本实验中所使用的滤纸片直径为6mm，大小适中。若滤纸片太大，浸泡吸收的溶液过多，会导致产生的抑菌圈过大且有交集，影响结果的判断。
3.滤纸片的处理
滤纸片经抗生素溶液或无菌水浸泡后，用无菌镊子夹出，可贴在离心管内壁或在管口轻刮几下沥干水分，以免吸收过多液体，在平板上向周围扩散漫开，影响结果观察和抑菌圈直径的测量。将滤纸片放置在平板上时，尽量一次到位不要移动。
4.耐药菌株的选择
抗生素在培养基上会形成一个以滤纸片为中心的浓度梯度，所以耐药性较强的细菌会分布在抑菌圈的边缘。传代培养时，用灼烧后的接种环从抑菌圈的边缘刮下一些细菌，溶于新的液体培养基中即可。
注意事项
1.用火柴点燃酒精灯后，待火星熄灭再扔置废液缸。
2.未使用的抗生素溶液可置于4℃冰箱保存。
3.操作完毕，及时清洗手部，并将培养皿、菌液和耗材高压灭菌，避免耐药菌造成污染。
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